Michael Peres adore photographier les petits détails de notre monde naturel. Professeur de communications photographiques biomédicales au Rochester Institute of Technology, Peres se spécialise dans la capture de ces détails complexes en les photographiant au microscope. Ici, il explique comment il fait.
Je me suis intéressé à prendre des photos de petites choses il y a plus de 40 ans, alors que j'étudiais en médecine à l'université. J'ai été exposé à ce monde fascinant et invisible tout en apprenant à délimiter le tissu musculaire du tissu conjonctif à l'aide d'un microscope optique. J'ai été entraîné dans chaque nouveau sujet qu'on m'a demandé d'étudier et je suis toujours étonné de voir comment les choses sont organisées. J'adore photographier des flocons de neige, des fleurs et d'autres objets naturels. J'ai commencé à partager mon travail sur Instagram en mars 2014 et j'ai été fasciné par les abonnés du monde entier qui sont attirés par mes images.
Trouver un sujet pour la photographie microscopique
Pour trouver un bon sujet, il faut d'abord rester curieux du monde. Je trouve qu'il est vraiment important d'avoir l'esprit ouvert sur les échantillons potentiels. L'autre jour, en promenade avec mon chien, il est rentré chargé de bavures. Après en avoir retiré le plus possible, j'ai décidé d'en examiner un au microscope. Ce n'était qu'une mauvaise herbe, mais au microscope, elle est devenue élégante et complexe.
La localisation et la manipulation de petits objets sont une grande partie du succès du processus. Les échantillons endommagés ou ceux avec des artefacts auront une présentation visuelle différente des excellents échantillons et il est important de ne pas laisser les dommages devenir le centre de la photographie. Trouver un échantillon sans défaut est la première priorité pour le type de photos que je veux faire. Cela ne veut pas dire que les sujets de mes photographies sont parfaits, ils ne le sont pas.
Il y a deux choses différentes auxquelles je pense lorsque je prépare un échantillon photographier - dissection et isolement, lequel de ceux-ci a priorité dépend du sujet et de son grossissement. Lorsque je photographie des fleurs, j'utilise généralement des ciseaux à dissection pour retirer les pétales afin d'améliorer la visibilité de ses éléments structurels. Lorsque je photographie des organismes aquatiques, j'essaie de les isoler dans une goutte d'eau sous une lamelle couvre-objet. Moins est toujours plus dans ce cas. Chaque sujet pose des problèmes uniques et nécessite différentes méthodes pour rendre l'échantillon suffisamment petit, suffisamment plat ou suffisamment fin pour être photographié.
J'achète également des lames biologiques préparées telles que des coupes transversales de plantes ou de tissus animaux. Il est très difficile de préparer ces types de lames sans équipement de précision. Wards Natural Science et Carolina Biological Supply Company vendent des milliers de sujets préparés pour l'examen microscopique.
Matériel nécessaire pour faire une image microscopique
Lors de la prise d'images microscopiques, mes équipements essentiels sont des microscopes, une lumière à fibre optique, un boîtier d'appareil photo reflex numérique, un objectif macro, des tubes d'extension, des soufflets et un trépied. Lorsque je photographie des flocons de neige, des fleurs ou d'autres sujets trouvés dans la nature, je suis souvent dans mon garage et je garde une réserve de lames de microscope propres et un morceau de tissu de velours noir à utiliser comme arrière-plan. J'ai également de nombreuses aiguilles, de minuscules pinceaux et des bâtons de coton que j'utilise pour déplacer les échantillons et ranger la zone autour d'eux.
J'utilise généralement un microscope optique composé pour ma photographie. Les microscopes optiques sont assez courants et faciles à trouver. Ils peuvent être chers ou relativement bon marché, un microscope étudiant peut coûter aussi peu que 250 $ tandis qu'un microscope haut de gamme de qualité recherche peut coûter 200 000 $. Un assez bon microscope d'occasion bas de gamme peut être trouvé pour 5 000 $.
Les microscopes agrandissent les sujets en utilisant deux lentilles. Le premier étage de grossissement est produit par l'objectif et le deuxième étage de grossissement est l'oculaire. Un objectif a une distance focale, tout comme les objectifs photographiques traditionnels utilisés sur un appareil photo reflex numérique. Les distances de travail sont très petites pour ce type de photographie - une plage typique de grossissements d'objectifs pour un microscope optique peut inclure un 2x, 4x, 10x, 20x, 40, 60x ou 100x. Je sélectionne mon objectif sur le microscope en fonction des exigences de grossissement de l'échantillon. Le grossissement influence la profondeur de champ de l'image. Ainsi, un gros échantillon épais (0,5 cm) bénéficie d'un faible grossissement, tandis que les sujets très plats nécessitent un grossissement plus important.
Lors de l'utilisation d'un microscope optique, il est possible de prendre des photos à l'aide d'un smartphone ou d'un appareil photo à objectif fixe et constitue un excellent point de départ. Avec ces caméras, l'objectif doit être placé au point oculaire du microscope, qui peut être localisé en tenant un morceau de papier à environ 1 cm de l'oculaire du microscope. Un très petit point de lumière sera visible sur le papier, c'est le point de vue et là où l'objectif doit être dirigé. Un petit trépied peut être utile pour maintenir l'appareil photo en place. La bande de Gaffer est souvent mon meilleur ami en tant que photographe technique car elle me permet de sécuriser le téléphone des autres éléments du système lors de mes prises de vues.
Bien que l'utilisation d'un smartphone ou d'un appareil photo à objectif fixe fonctionne, j'aime utiliser un Nikon D300s ou D800 avec l'objectif retiré et le corps suspendu au-dessus de l'oculaire du microscope à l'aide d'un support de copie vertical ou d'un trépied. J'utilise également des tubes d'extension ou des soufflets sur mon appareil photo pour gérer la lumière ambiante, ce qui peut créer des reflets et réduire le contraste. Avec un reflex numérique, vous devez aligner le capteur de l'appareil photo sur le petit point de lumière du point de vue. Pour faire une image microscopique, j'alignerai le capteur de mon appareil photo sur l'oculaire à une distance où le cercle d'éclairage produit par le microscope est suffisamment grand pour couvrir le capteur sans voir le cercle. Confirmez que le point lumineux a recouvert le capteur en vérifiant l'écran LCD de l'appareil photo. Soyez prudent lors de l'installation :il est très important de faire attention à la distance entre l'oculaire et le capteur non protégé.
Éclairer votre sujet microscopique
J'utilise principalement la lumière intégrée du microscope et je la complète avec un éclairage à fibre optique. Lorsque je regarde un échantillon pour la première fois, j'imagine à quoi je veux que l'image ressemble et je travaille pour y arriver. Je fais de nombreux petits ajustements à la position de la lumière, ce qui fait une grande différence dans les résultats. Certains des sujets que je photographie peuvent mesurer un ou deux millimètres, voire moins. La quantité de lumière d'appoint nécessaire ou ce qui rend l'angle de lumière juste sont les décisions que je prends avant la prise de vue. Ma stratégie repose en grande partie sur la façon dont la lumière fonctionne avec l'échantillon lui-même. Les trois styles d'éclairage que j'utilise le plus régulièrement sont Kohler, Darkfield et Polarized, lisez la suite pour plus d'informations sur chacun d'eux.
Comment j'utilise l'éclairage Kohler pour photographier des sujets microscopiques
Lorsque je photographie une « coupe mince » préparée, j'essaie de créer un rétro-éclairage neutre et uniforme appelé éclairage Kohler. Ce style d'éclairage permet au microscopiste de maximiser le contraste et la résolution de l'image et la production d'un éclairage uniforme et uniforme derrière l'échantillon. Je continue à l'utiliser car il crée des traitements de type portrait des choses que je photographie.
Comment j'utilise l'éclairage Darkfield lors de la prise de vue de sujets microscopiques
J'utiliserai également le fond noir, qui fait briller un objet sur un fond noir , créant un look de type astronomique. L'éclairage à fond noir provient de l'arrière d'un sujet transparent et brille à travers l'échantillon selon des angles obliques. Ce style d'éclairage produit un aspect très spectaculaire, l'inconvénient est que tout sera éclairé lors de l'utilisation du fond noir, y compris les éléments que vous ne voulez pas éclairer, comme la saleté, les rayures ou les bulles d'air.
Comment j'utilise l'éclairage polarisé lors de la prise de vue de sujets microscopiques
J'utilise une lumière polarisée lorsque je photographie des échantillons présentant une biréfringence, qui est un terme technique qui décrit comment un échantillon peut ou non "afficher" des couleurs arc-en-ciel lorsqu'il est placé dans un microscope à lumière polarisée. Les échantillons contenant des poils, des fibres, des produits chimiques, des minéraux, des ailes d'insectes et de nombreux objets synthétiques donneront l'impression d'être constitués d'arcs-en-ciel lorsqu'ils seront examinés à la lumière polarisée. La lumière polarisée est utilisée pour révéler des informations internes dans ces échantillons qui, autrement, pourraient ne pas être visibles.
Faire la mise au point lors de la prise de photos microscopiques
Pour faire la mise au point de l'image agrandie avec mon DSLR, je retire l'objectif de l'appareil photo et projette l'image directement dans le boîtier de l'appareil photo DSLR. Les commandes de mise au point du microscope sont ensuite utilisées pour faire la mise au point de l'image dans le viseur de l'appareil photo. Faire une image nette peut être difficile. Le viseur du DSLR ne capte pas la même quantité de détails fins que le microscope peut créer, donc les choses semblent souvent un peu plus grossières dans le viseur, puis elles finissent par regarder dans les fichiers RAW. Il faut un peu de pratique pour pouvoir prédire comment l'image apparaîtra une fois enregistrée.
Il est également possible de faire la mise au point à l'aide de la vue en direct. Dans une pièce faiblement éclairée, cela peut être très utile pour observer la définition d'image critique dans un échantillon. Si vous utilisez un smartphone qui a été soigneusement positionné au-dessus de l'oculaire, vous souhaiterez toujours faire la mise au point de l'image affichée sur l'écran du téléphone en manipulant le bouton de mise au point du microscope.
Traitement de vos images microscopiques
L'un des plus grands défis dans ce type de travail est de créer un contraste et une délimitation structurelle des parties internes et j'essaie de travailler dur pendant les prises de vue. Lorsque je photographie, je travaille lentement pour obtenir un résultat intéressant en utilisant des objectifs et de la lumière.
Je suis très prudent quant à un traitement d'image trop important. En post-traitement, je suis plus intéressé par la gestion des tons, la définition de points blancs ou noirs et la suppression de la saleté non pertinente. Je prends des photos en RAW, j'ouvre le fichier RAW dans Photoshop, puis je prétraite les détails structurels qui sont présents dans le fichier, mais souvent peu visibles. J'effectue également une petite quantité de clarification ou d'affûtage à ce stade. Après avoir apporté des modifications mineures aux tons dans Photoshop, j'affinerai le fichier à l'aide du filtre passe-bande haut.
Je pense qu'il est important que les images ne soient pas totalement parfaites. Rien n'est parfait dans la vie et je pense que si les images sont trop parfaites, elles pourraient sembler générées par ordinateur. Mon objectif pour ce travail est de faire des photographies scientifiques qui fonctionnent dans des environnements non scientifiques et permettent aux gens d'apprendre quelque chose de nouveau sur le monde dans lequel ils vivent. Mes photos présentent des choses réelles et la vie a aussi des imperfections et des zones floues.